X射线三维显微镜摄影使得很大数目的显微镜在较短时间内涵一个很小的标本区域内进行,在某种水平上就大概束了每一片格的暴光时间;既使在进行缩时拍摄时,也因思量到活体细小生物或活体细胞处于接续地行动状况,因此在显微镜中暴光时间的很大的解放度在这里就不存在了。活体生物行动的另一个结果是的聚焦平面也是时常更改的,既即是活体生物自己(例如细菌或游离细胞)偶然乃至能够挪动到视场以外,因此在尼康显微镜影戏拍摄时代应该对物体平面上的聚焦接续地进行调治,而且密切监督被拍摄的活体对象,使它时常处于视场的中心。这种聚焦和监督是通过摄影机上的一个具备半反射棱镜的聚焦目镜来进行的.
由于思量到在X射线三维显微镜摄影中很短的暴光时间,显微镜在聚焦目镜中应用使光进行不对称漫衍的分外棱镜,70%的光用于摄影,30%的光用于聚焦和监督。用于显微镜的光源大多数是气体放电灯(高压汞灯或氮灯),除了很低的放大倍数以外,在许多情况下特别是应用相差技术时,白炽灯不能够产生充足的亮光度以保证显微摄影所必需的很短的暴光时间。在曝光时间的控制中应该留意到,与摄影速率相联系的暴光时间不会随摄影机速率而变更,惟有在照明中留有充足的余地,在应用不同感光速率的胶片质料和中密度滤片刻,才气到达的暴光。在显微镜摄影中,由于进行短时间的暴光,使高速摄影机的应用也受到必然的大概束。若以64格/秒的速率拍摄,在一分钟内就能够拍摄30m胶片,在此时代大概不少于4,000个片格应该被暴光。既应用18--'24格/秒的普通速率(相当于普通影戏的放映速率),暴光时间也不能够低于1/50s,因为从一个格移到另一格的时间也务必计较在内,在此时代摄影机的快门务必封闭。
在科学钻研中所应用的X射线三维显微镜影戏胶片普通为16毫米的胶片,这种胶片图像的尺寸为7.5x10.4毫米,每米长度具备130格。而每米具备52格的35毫米的胶片在显微镜中是不常应用的,这不仅由于它的图像面积(16x22毫米)是16毫米胶片的4.5倍,从而减小了图像平面上的光密度,而且在经济上也是很不合算的。当今在另有一种超一8胶.片已被用于显微镜摄影,它的图像尺寸为4.2x5.7毫米,这种胶片的一个大的好处是与16毫米胶片相比费用更低,固然它不适于为大量的观众放映,但在科学钻研中或是有较大的代价。